索拉非尼是多靶点的分子靶向性新药,用于治疗转移性肾癌和肝癌

概括：

索拉非尼是一种多靶点分子靶向新药，用于治疗转移性肾癌和肝癌。其分子靶点包括 Raf-1 等。有报道称，索拉非尼可通过下调Mcl-1的表达诱导急性髓系白血病细胞凋亡。另一项研究发现，在50%的急性髓细胞白血病患者中处于持续激活状态，而Mcl-1受到调节。这些结果提示索拉非尼诱导的急性髓系白血病细胞凋亡可能与其抑制活性有关。所以在第一章我们研究了索拉非尼的作用。发现索拉非尼可抑制急性髓系白血病患者外周血细胞酪氨酸位点的磷酸化。这一结果也在急性髓细胞白血病细胞系HL60中得到证实。索拉非尼还下调转录水平和下游基因 Mcl-1 和 Bcl-2 的表达。通过进一步研究发现，索拉非尼对 也有抑制作用，但对 没有影响。为了证明索拉非尼活性的抑制可导致髓系白血病细胞凋亡，我们用和抑制剂特异性阻断该通路，发现两种髓系白血病细胞系的细胞凋亡显着增加。此外，慢病毒载体的持续激活可增加HL60细胞对索拉非尼的耐受性，细胞凋亡现象明显减少。为了证明索拉非尼活性的抑制可导致髓系白血病细胞凋亡，我们用和抑制剂特异性阻断该通路，发现两种髓系白血病细胞系的细胞凋亡显着增加。此外，慢病毒载体的持续激活可增加HL60细胞对索拉非尼的耐受性，细胞凋亡现象明显减少。为了证明索拉非尼活性的抑制可导致髓系白血病细胞凋亡，我们用和抑制剂特异性阻断该通路，发现两种髓系白血病细胞系的细胞凋亡显着增加。此外，慢病毒载体的持续激活可增加HL60细胞对索拉非尼的耐受性，细胞凋亡现象明显减少。

在本章中，我们还研究了索拉非尼联合伊马替尼治疗髓性白血病的效果。结果表明，联用对抑制K562细胞增殖具有协同作用，因此这两种药物联用可用于治疗慢性粒细胞白血病。在第一章的最后一节，我们发现如果在骨髓细胞或脾细胞上过表达，细胞的持续激活可以显着增加细胞数量，这可能有助于理解多发性骨髓瘤的发病机制。在第二章中，我们发现了索拉非尼在急性髓系白血病细胞中的新靶点Src激酶。索拉非尼不通过 Jak 激酶抑制活性和下调 IL-6 分泌，但通过抑制 Src 激酶的活性，IC50 约为 0.6μM。此外，在 HL60 细胞中，我们通过免疫共沉淀实验证明 Src 相互结合，并且可以抑制 Src I（Src 激酶抑制剂）的磷酸化。Src(I) 还诱导了K562 和HL60 细胞的凋亡。Src激酶是索拉非尼在急性髓细胞白血病细胞中的直接作用靶点的发现，对于了解索拉非尼治疗急性髓细胞白血病的分子机制具有重要意义。在第三章中，我们发现了索拉非尼的另一个新靶点，Lck 激酶，以及由此产生的免疫抑制活性。可以被抑制。Src(I) 还诱导了K562 和HL60 细胞的凋亡。Src激酶是索拉非尼在急性髓细胞白血病细胞中的直接作用靶点的发现，对于了解索拉非尼治疗急性髓细胞白血病的分子机制具有重要意义。在第三章中，我们发现了索拉非尼的另一个新靶点，Lck 激酶，以及由此产生的免疫抑制活性。可以被抑制。Src(I) 还诱导了K562 和HL60 细胞的凋亡。Src激酶是索拉非尼在急性髓细胞白血病细胞中的直接作用靶点的发现，对于了解索拉非尼治疗急性髓细胞白血病的分子机制具有重要意义。在第三章中，我们发现了索拉非尼的另一个新靶点，Lck 激酶，以及由此产生的免疫抑制活性。

通过比对两种激酶 Src 和 Lck 的 ATP 结合区的序列，我们发现存在高度的保守性。对小鼠 CD4+ T 细胞和 T 淋巴瘤细胞系细胞的实验表明，索拉非尼在 T 细胞活化期间抑制 Lck 的磷酸化。Lck 募集过程也受到免疫荧光染色的抑制。由于Lck是T细胞活化过程中的重要激酶，因此我们研究了索拉非尼对CD4+ T细胞增殖、活化和分化的影响。结果表明，索拉非尼剂量依赖性地抑制各种抗原诱导的CD4+T细胞增殖，但对CD4+T细胞的凋亡无影响。同时，索拉非尼剂量依赖性地抑制活化分子CD25和CD69的表达。进一步研究发现，索拉非尼抑制Th1细胞因子的产生，阻断CD4+T细胞向Th1细胞的分化，但不影响Th2细胞因子的产生。在 T 细胞介导的过敏性皮炎小鼠模型中，索拉非尼剂量依赖性地改善了 2,4,6 三硝基氯苯诱导的小鼠耳肿胀。由于索拉非尼同时具有抗白血病和免疫抑制活性，对需要造血干细胞同种异体移植的白血病患者非常有益。为了找到具有这种特性的免疫抑制剂，在第 4 章中，我们研究了几种新型且具有免疫活性的螳螂内生菌的代谢物。令我们惊讶的是，A()既具有很强的免疫抑制活性，又具有抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖的活性。综上所述，本文首次报道Src激酶是索拉非尼在急性髓系白血病细胞中的直接作用靶点，Src通路在索拉非尼诱导的急性髓系白血病细胞凋亡中起重要作用。同时，首次发现Lck激酶是索拉非尼在T细胞中的作用靶点及其免疫抑制活性。

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