吉非替尼、培美曲塞在肺腺癌的治疗

【摘要】目的：吉非替尼(,)和培美曲塞()在肺腺癌的治疗中发挥重要作用。本研究拟通过体外实验初步比较吉非替尼和培美曲塞对EGFR外显子19突变肺腺癌细胞系PC9的生长抑制和促凋亡作用，并比较两者联合放疗的放射效果。探索其致敏作用及其作用机制，为今后治疗局部晚期EGFR外显子19突变肺腺癌提供一定的实验依据。方法本研究培养PC9细胞，采用四甲基唑盐比色法（MTT）法检测吉非替尼和培美曲塞在不同浓度、不同时间对PC9细胞的生长抑制作用。 %抑制浓度，即IC20（20%），选择IC20作为实验浓度。实验分为空白组、吉非替尼组、培美曲塞组、单纯放疗组、吉非替尼+放疗组、培美曲塞+放疗组。克隆形成试验用于检测吉非替尼和培美曲塞在不同辐射剂量（OGy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy）下对PC9细胞IC20浓度的影响。 (1-exp(-k*x))^N) 拟合生存曲线。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞周期。用印迹法检测组蛋白（细胞20）的表达水平，并讨论其与放射敏感性的关系。

结果1.吉非替尼和培美曲塞以时间浓度依赖性方式抑制PC9细胞的生长。吉非替尼48小时IC20约为0.014μmol/L；培美曲塞48小时的IC20约为0.084μmol/L。 2.培美曲塞+放疗组和吉非替尼+放疗组的Dq、D0、SF2低于放疗组；吉非替尼+放疗组的增敏比SER(·)为1.1，培美曲塞+放疗组的SER为1.4，培美曲塞的放疗增敏作用高于吉非替尼。 3.吉非替尼、培美曲塞和放疗都可以增加细胞凋亡率。药物联合放疗可增加放疗诱导的细胞凋亡，但培美曲塞联合放疗的细胞凋亡率高于吉非替尼。结合放疗，细胞凋亡率较高，再次证实培美曲塞的放射增敏作用高于吉非替尼。细胞周期检测显示，吉非替尼可将细胞阻滞于G1/Go期，培美曲塞可阻滞细胞于S期。联合放疗后，S期细胞比例降低，G2/M期细胞比例降低。吉非替尼、培美曲塞和放疗对的比例显着增加（P0.05).4.放疗前后药物组合的蛋白表达水平有显着变化；吉非替尼、培美曲塞和放疗组与放疗组相比，吉非替尼或培美曲塞联合放疗的表达明显增加，培美曲塞+放疗组明显高于吉非替尼+放疗组。对外显子突变的PC9肺腺癌细胞作用，培美曲塞强于吉非替尼，两种药物的放射增敏机制之一可能是由于放射敏感性G2/M期比值增加，而放射耐受性S期减少；蛋白表达可能增加PC9细胞的放射敏感性。