体内外实验观察中药单体人参皂苷Rg3分子靶向药物

总结：

目的：通过体外和体内实验观察中药单体人参皂甙Rg3、分子靶向药物索拉非尼、化疗药物奥沙利铂三种药物不同组合模式对肝癌细胞株和裸鼠模型的影响。人肝癌转移（LCI-D20)对异种移植肿瘤的影响，并探讨其对细胞周期及相关蛋白表达的影响，为肝癌与中药、化疗药物及方法：(1)MTT法观察人参皂甙Rg3、索拉非尼、奥沙利铂单药及不同联合用药（二药联合、三药联合）对肝癌细胞增殖的影响。体外，计算中位抑制浓度（IC5o）。（2)流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布。（3)方法用于d检测细胞周期相关蛋白p53、p21、p27、PTEN在人肝癌裸鼠转移模型肿瘤组织中的表达结果：（1)与对照组相比，除索拉非尼、人参皂苷Rg3和奥沙利铂外，低浓度24h不能充分发挥药效，对细胞无明显抑制作用（P0.05)，3种药物给药48h和72h对细胞增殖有显着抑制作用（P0.0< @1);三种药物单独作用于细胞24h、48h、72h后，与同浓度同种药物不同时间比较，差异有统计学意义（P0.05)。

(2)联合治疗后，与奥沙利铂单药组比较，奥沙利铂+人参皂苷Rg3组（P0.05)和奥沙利铂+索拉非与人参皂苷Rg3单药组比较，奥沙利铂+人参皂苷Rg3组和人参皂苷Rg3+索拉非尼组升高（P0.01)；与索拉非尼单药组相比，奥沙利铂+索拉非尼组和人参皂苷Rg3+索拉非尼组抑制率更高（P0.05）。 01);与单药组和二药联合组各三药联合组的抑制率均显着升高（P0.01)。通过q计算，比较与单药组相比，奥沙利铂+人参皂甙Rg3的组合表现为相加效应（q=0.92)，人参皂甙Rg3+索拉非尼组合（q=1.39)和奥沙利铂+索拉非尼（q=1） ) .23)联合用药表现出协同作用。与两药联合用药相比，人参皂甙Rg3+奥沙利铂pl我们索拉非尼（q=1.14)，奥沙利铂）+人参皂甙Rg3（q=0.86)）在索拉非尼的基础上表现出累加效应，人参皂甙Rg3+索拉非尼是在奥沙利铂的基础上加入的（ q=1.17)表现出协同作用。（3)流式细胞仪检测细胞周期，发现人参皂苷Rg3可以阻断G0/G1期细胞，奥沙利铂阻断S期细胞，等等。雷非尼阻断G0/G1期细胞，联合治疗后：人参皂苷Rg3+奥沙利铂组细胞阻断G0/G1期、S期；人参皂甙 Rg3+索拉非尼在 G0/G1 期被阻断。 G1期和S期；奥沙利铂+索拉非尼组细胞在S期受阻；人参皂甙Rg3+奥沙利铂+索拉非尼联合用药后，细胞被阻断在G0/G1期、S期、G2/M期。

(4)流式细胞仪检测细胞凋亡发现单独使用人参皂甙Rg3、奥沙利铂、索拉非尼，两药三药合用可诱导细胞凋亡，与阴性对照组相比，凋亡率各药物组均显着升高（P0.01)；与各单药组比较，除人参皂苷Rg3+索拉非尼组外的两个药物组与人参皂苷Rg3比较单药组和双药组比较联合组，三药联合组有明显的细胞凋亡诱导作用（P0.05)）.01).（5)法显示各单药组，二药联合组和三药联合组均能下调裸鼠人肝癌异种移植细胞中突变型p53的表达，上调p21的表达，p27和PTEN的表达在联合治疗中比单药更明显。结论：(1)人参皂苷Rg3、索拉非尼、奥沙利铂、 r 单药或相互联合用药，可显着影响肝癌细胞的增殖。有明显的抑制作用，抑制作用呈时间依赖性和剂量依赖性；二药和三药联合组具有相加或协同作用。 (2)各药组均有诱导细胞凋亡作用，三药联用与二药组和二药组相比，二药组比单药诱导细胞凋亡作用更明显(3)各药物组主要阻断GO/G1期和S期细胞，联合用药具有更广泛的阻断作用(4)进一步的体内实验证实三药可通过下调突变型p53的表达和上调部分相关的表达来抑制肿瘤，联合用药比单药效果更明显。

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